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如何判斷ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌步驟是否正確?
更新時(shí)間:2025-06-16瀏覽:177次

  如何判斷ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌步驟是否正確?


  以下是天津本生判斷ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌步驟是否正確的關(guān)鍵指標(biāo)及驗(yàn)證方法,Elisa試劑盒 綜合操作規(guī)范與結(jié)果分析:

  一、?直接觀察指標(biāo)?

  孔內(nèi)液體狀態(tài)?

  正確:洗滌后孔內(nèi)清澈透明,無(wú)可見顆?;驓埩粢旱巍?/p>

  錯(cuò)誤:液體渾濁、有絮狀物或孔壁掛液(提示洗滌不凈)。

  拍干效果?

  正確:垂直拍板后吸水紙上無(wú)液體殘留印記。

  錯(cuò)誤:拍板后孔底仍有反光液膜(需增加拍干力度或次數(shù))。

  二、?實(shí)驗(yàn)過(guò)程監(jiān)控?

  洗滌參數(shù)合規(guī)性?

  洗液量:每孔需注滿300μL以上,確保覆蓋全部孔壁。

  靜置時(shí)間:每次洗滌后靜置1-2分鐘,短于30秒可能影響去污效果。

  次數(shù):至少3次,高背景樣本需增至5-6次。

  洗板機(jī)性能檢查?

  吸液殘留量應(yīng)≤2μL,可通過(guò)注入染料溶液測(cè)試殘留。

  噴頭無(wú)堵塞,各孔注液量差異<5%。


試劑盒.jpg


  三、?結(jié)果驗(yàn)證方法?

  異?,F(xiàn)象? ?可能原因? ?糾正措施?

  高背景信號(hào)? 非特異性結(jié)合殘留 增加洗滌次數(shù)至5次,延長(zhǎng)靜置時(shí)間

  復(fù)孔CV>15%? 孔間交叉污染或洗滌不均 檢查拍板動(dòng)作,校準(zhǔn)洗板機(jī)參數(shù)

  標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差? 洗滌過(guò)度導(dǎo)致復(fù)合物解離 減少洗滌次數(shù)至3次,縮短靜置時(shí)間

  四、?質(zhì)控對(duì)照驗(yàn)證?

  空白對(duì)照?

  OD值應(yīng)接近0(顯色底物本底),若>0.1需檢查洗滌液污染或殘留。

  陰性對(duì)照?

  顯色強(qiáng)度需低于臨界值(Cut-off)的1/3,否則提示洗滌不足。

  五、?特殊場(chǎng)景判斷?

  手工洗滌?:需確保每孔注液量一致,避免洗液溢出污染鄰孔。

  自動(dòng)化洗滌?:定期用亞甲藍(lán)溶液測(cè)試洗板機(jī)覆蓋率,遺漏孔需人工補(bǔ)洗。

  通過(guò)上述多維度評(píng)估可系統(tǒng)性驗(yàn)證洗滌效果,若問(wèn)題持續(xù)建議更換洗滌液批次或聯(lián)系技術(shù)支持。

  注:以上資料僅供參考,如需更詳細(xì)說(shuō)明,可參考具體品牌商附帶產(chǎn)品信息。

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