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ELISA實驗中洗板操作的關(guān)鍵注意事項
更新時間:2025-07-08瀏覽:56次

  ELISA實驗中洗板操作的關(guān)鍵注意事項

  以下是ELISA實驗中洗板操作的關(guān)鍵注意事項,綜合多來源信息整理:

  一、洗滌液處理

  新鮮配制?

  洗滌液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免絮狀物堵塞洗板機噴頭或造成花板現(xiàn)象。

  推薦使用去離子水/蒸餾水稀釋濃縮液,吐溫20濃度控制在0.05%-0.2%(過高會解吸附抗體)。

  溫度控制?

  冬季需保持洗液溫度20-30℃,低溫易導(dǎo)致洗滌不凈。

  二、手工洗板要點

  操作規(guī)范?

  加液量以剛滿反應(yīng)孔為限(約200-300μL),避免孔間交叉污染。

  甩板時需垂直翻轉(zhuǎn)120-150度,迅速干脆,禁止手腕搖擺旋轉(zhuǎn)。

  拍干技巧?

  使用無碎屑濾紙(非衛(wèi)生紙),每次拍打更換區(qū)域,最后一次需拍干。

  力度適中:過輕殘留多,過猛可能損壞板條。

  三、洗板機使用

  參數(shù)設(shè)置?

  洗滌量350μL/孔,浸泡30-60秒,洗板4-5次(根據(jù)說明書調(diào)整)。

  需檢查噴頭通暢性,殘留量應(yīng)≤1μL/孔。

  補充處理?

  機洗后建議人工補洗1-2次,減少液體殘留。

  四、通用注意事項

  防止污染?

  高濃度樣本孔與空白孔需間隔布局,甩液時優(yōu)先處理低濃度孔。

  洗板前兩遍需特別注意防溢。

  時間控制?

  每步洗滌靜置1-2分鐘,總洗滌時間不足會導(dǎo)致背景偏高。

  板面維護?

  保持酶標(biāo)板濕潤,避免孔內(nèi)干涸導(dǎo)致酶失活。

  五、錯誤操作警示

  禁止?:減少洗滌次數(shù)、縮短浸泡時間、重復(fù)使用吸水紙、混用不同品牌洗液。

  避免?:洗板后長時間暴露空氣(顯色OD值會衰減)。

  通過規(guī)范操作可顯著降低背景干擾,提高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。若出現(xiàn)花板現(xiàn)象,建議檢查洗液新鮮度及溫度。

  注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據(jù),完整操作請以實說明為準(zhǔn),不同品牌可能存在細節(jié)差異?。

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