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如何避免樣本損失?低吸附離心管的核心使用要點(diǎn)
第一部分：如何避免樣本損失
樣本損失通常由兩個(gè)因素導(dǎo)致：物理吸附 和 化學(xué)降解。低吸附管主要解決前者，但綜合策略才能達(dá)到最佳效果。
選擇正確的耗材(治本之策)：
使用低吸附離心管/吸頭：這是最直接有效的方法。它們經(jīng)過(guò)特殊處理，能顯著減少生物大分子的非特異性吸附。
注意材質(zhì)：聚丙烯(PP)是標(biāo)準(zhǔn)材質(zhì)，但表面仍有疏水性。低吸附管通常通過(guò)物理或化學(xué)修飾使管壁更親水、更光滑。
優(yōu)化實(shí)驗(yàn)操作：
預(yù)先潤(rùn)洗：即使使用低吸附管，對(duì)于極其珍貴或低濃度的樣本，用與樣本緩沖液相似的溶液快速潤(rùn)洗一下管壁和吸頭，可以飽和潛在的吸附位點(diǎn)。注意：對(duì)于蛋白樣本，常用0.1% BSA溶液潤(rùn)洗，但需確認(rèn)BSA不會(huì)干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
減少轉(zhuǎn)移步驟：每一步液體轉(zhuǎn)移都會(huì)帶來(lái)?yè)p失。盡量減少樣本在不同容器間的轉(zhuǎn)移次數(shù)，整合實(shí)驗(yàn)步驟。
精準(zhǔn)操作：使用量程合適的移液器和吸頭，確保吸打和排液，避免液體殘留。對(duì)于微量樣本，可采用反向移液法以提高精度。
注意樣本特性與保存：
分裝保存：避免反復(fù)凍融。將樣本分裝成小份，每次只取用一份，最大限度減少降解和管壁吸附的總機(jī)會(huì)。
添加保護(hù)劑：根據(jù)樣本類(lèi)型添加合適的保護(hù)劑。例如，在核酸樣本中加入EDTA抑制核酸酶，在蛋白樣本中加入蛋白酶抑制劑 cocktail。
使用合適的緩沖液：含有少量去垢劑或載體蛋白的緩沖液可以競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合管壁，減少目標(biāo)分子的吸附。同樣，需確認(rèn)這些添加劑不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
第二部分：低吸附離心管的核心使用要點(diǎn)
低吸附管是工具，正確使用才能發(fā)揮其最大價(jià)值。
認(rèn)清標(biāo)識(shí)，選擇正品：
認(rèn)準(zhǔn)包裝和管身上的 “Low-Bind"、“Non-Stick" 等標(biāo)識(shí)。
選擇信譽(yù)良好的品牌供應(yīng)商，避免使用偽劣產(chǎn)品。劣質(zhì)管可能不僅無(wú)效，還會(huì)引入雜質(zhì)(如RNase)。
區(qū)分應(yīng)用，按需選擇：
核酸應(yīng)用：尤其是微量DNA、PCR產(chǎn)物、小片段核酸或珍貴文庫(kù)，應(yīng)使用低吸附管。它們能有效防止核酸吸附，保證濃度和產(chǎn)量的準(zhǔn)確性。
蛋白應(yīng)用：對(duì)低濃度蛋白、酶、抗體、多肽等至關(guān)重要。吸附會(huì)導(dǎo)致活性喪失、定量不準(zhǔn)和信號(hào)減弱。
常規(guī)應(yīng)用：對(duì)于細(xì)菌培養(yǎng)、大量樣本儲(chǔ)存、離心沉淀等操作，標(biāo)準(zhǔn)離心管已足夠，無(wú)需浪費(fèi)低吸附管。
正確標(biāo)記：
低吸附管的表面通常也更疏水，普通記號(hào)筆可能難以書(shū)寫(xiě)或容易脫落。
建議使用專(zhuān)用的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)記筆或打印的標(biāo)簽。
存儲(chǔ)注意：
按照說(shuō)明書(shū)要求，存放在干燥、避光、常溫的環(huán)境中。避免溫度或濕度影響其性能。
遵循以上要點(diǎn)，您可以最大限度地減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的樣本損失，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢(xún)技術(shù)老師。
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